抗酸化能評価-SOD様活性測定

はじめに

呼吸や様々な外的要因により発生した活性酸素の多くは、その反応性の高さによりDNAや酵素などのタンパク質に結合することにより、結果として生体機能を低下させ、各種疾病の発生や老化を促進させることが分かっています。これらのストレスに対する防御作用(抗酸化能)を持つ物質は多数報告されており、SOD(スーパーオキサイドディスムターゼ:Superoxide Disumutase)は、そのような物質の一つです。SODはスーパーオキサイドを過酸化水素と酸素に不均化分解することで、その毒性を低減し、過酸化水素はカタラーゼなどの酵素により水と酸素に分解され無毒化されます。

 近年、食品の持つ抗酸化能を利用した健康維持、疾病の予防に関する研究が注目を集めています。生体は極めて複雑なシステムが共同して機能しており、体内の微生物の働きの重要性が議論されています。食品は栄養を摂取すると同時に微生物にも影響を与えるため、その抗酸化能は体内微生物の菌叢にも関与することが考えられます。食品の持つラジカル消去活性を最も簡単に評価する方法として捉えることができます。

 

SOD様活性測定で分かること

SOD様活性とは、スーパーオキサイド(O2アニオンラジカル)の消去活性であり、この分析で用いる「SOD Assay Kit」によって、スーパーオキサイドを特異的に不均化分解するSODと同様にスーパーオキサイドと反応し不活性化させる能力を測ることができます。SOD Assay Kitの詳細につきましては、同仁化学研究所の製品サイトーSOD Assay Kit-WSTをご覧ください。このキットは、キットに含まれるキサンチンーキサンチンオキシダーゼによりスーパーオキサイドを発生させ、それを活性測定したいサンプルによって消去された量をWST-1ホルマザンの発色量から求め、消去量を算出するものです。下の図に測定の原理を示します。

SODアッセイ 酸化ストレス 抗酸化能 ラジカル消去活性 WST 抗酸化食品 抗酸化分析

​機能性食品

SOD様活性の単位

 

 SODの活性単位(ユニット)は測定法によって異なります。このSOD Assay Kit-WSTで規定される1ユニット(1単位)は、「WST還元の50%阻害を示すサンプル溶液20 µLに含まれているSOD様活性」と定義されます。そのためチトクロームC測定などで求めたユニットとは比較できませんので、ご注意ください。

例)緑茶のSOD活性測定

ペットボトルの緑茶のSOD様活性を測定した。サンプルの10倍希釈系列を作り、SOD Assay Kit-WSTでIC50を求めた

希釈溶液のIC50=0.0167(希釈度合)

希釈していない溶液のIC50=59.9(1/0.0167)

SODユニット=2,995 U/ml(59.9 x 10 x 5)

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